铁皮石斛属兰科石斛属植物，新鲜或干燥茎，为药食两用[1]，具有很好的抗衰老、抗肿瘤、抗氧化、提高免疫力的功效，并且可用于肿瘤、糖尿病、慢性咽炎、胃炎、机体免疫下降等的辅助治疗[2-4]。西洋参为五加科植物，根味苦、微甘、性寒，为珍贵药材[5]，现代研究表明，西洋参含有多种人参皂苷、维生素及微量元素等生理活性物质，具有增强抗疲劳能力、耐高温能力、抗肿瘤作用、降血脂作用、抗氧化作用、免疫调节作用、改善老年高血压患者的低舒张压情况等功效[6-9]。红景天为景天科红景天属草本或亚灌木植物[10]，具有增强人体免疫力、抗衰老、抗辐射、保护心脑血管等功效[11-13]。干姜为姜科植物姜的干燥根茎，是常用的药食同源中药材，化学成分主要包括挥发油和姜辣素类成分，具有极好的药用价值。目前为止，对铁皮石斛、西洋参、红景天和干姜的单一组分或2种组分联合的研究报道较多[1-12]，但未见对这4种药材配伍混合物的研究报道，试验以这4味药材提取物和辅料按照一定的工艺混合制成的胶囊为受试物进行安全性毒理学和功能研究，以期为石斛西洋参景天姜胶囊口服的安全性和功能性提供数据支持。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 受试物

石斛西洋参景天姜胶囊，该胶囊内容物主要包括铁皮石斛、西洋参、红景天、干姜提取物及辅料。于阴凉避光处保存，供试验备用。人体推荐摄入量为2.4 g/人/日。

1.1.2 试验动物及饲料

急毒试验用动物为健康成年SPF级ICR小鼠20只，雌雄各半，南京医科大学医药实验动物中心提供；微核试验和小鼠精子畸形试验选用清洁级ICR健康小鼠，扬州大学比较医学中心提供；30 d喂养试验用动物为SPF级健康离乳SD大鼠80只、功能试验用动物为SPF级CI/F1代健康雄性小鼠160只，雌雄各半，上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，试验动物在屏障系统中饲养；辐照鼠用灭菌饲料，江苏省协同医药生物工程有限责任公司提供。

1.1.3 仪器、菌株和试剂

T-1000型电子天平、JJ-100型电子天平、离心机、OLYMPUS型显微镜、日立7100型全自动生化分析仪、SIEMENS ADVIA 2120i型血液分析仪、离心机、水浴锅、多功能酶标仪、BIOSEN C＿Line GP+葡萄糖/乳酸分析仪、游泳箱（大小约50 cm×50 cm×40 cm）。鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株TA97、TA98、TA100、TA102 来源于 Molecular Toxicology，Inc.；S-9来源于江苏齐氏生物科技有限公司；血浆尿素试剂盒、肝糖原试剂盒，南京建成生物工程研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 急性经口毒性试验

用最大耐受量法开展小鼠急性毒性试验，设计剂量为 15 000 mg/kg·bw。

1.2.2 Ames试验方法

采用标准平板掺入法，选鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株TA97，TA98，TA100，TA102，经鉴定合格后开展试验。在加与不加S-9的情况下以5 000，1 000，200，40，8 μg/皿剂量进行试验，每个剂量3个平皿。同时设阳性、阴性对照组。以上试验过程重复1次。

1.2.3 小鼠骨髓细胞微核试验

25～30 g的ICR清洁级小鼠50只，雌雄各半，按体重随机分为5个组，每组10只。设1 250，2 500，5 000 mg/kg·bw 3个剂量组、阴性对照组（无菌水，20 mL/kg·bw灌胃） 和阳性对照组（环磷酰胺，40 mg/kg·bw腹腔注射）。采用30 h给受试物法，2次给样间隔24 h，第2次给样6 h后处死动物，取小鼠胸骨骨髓常规制片、镜检，计数1 000个骨髓嗜多染红细胞（PCE） /每支动物，计算微核发生率。计数200个嗜多染红细胞时所观察到的成熟红细胞数（NCE） /每只动物，计算PCE/NCE。

1.2.4 小鼠精子畸形试验

ICR清洁级雄性小鼠25只，分为5组，每组5 只。设 1 250，2 500，5 000 mg/kg·bw 3 个剂量组、阴性对照组（无菌水，20 mL/kg·bw灌胃） 和阳性对照组（环磷酰胺，40 mg/kg·bw腹腔注射）。给样每天1次，连续5 d。于第1次给样后的第35天处死动物，取两侧附睾精子滤液制片、镜检。每只动物计数1 000个精子（结构完整），计算精子畸形发生率。

1.2.5 反复染毒试验方法

SPF级健康离乳SD大鼠80只，雌雄各40只，分为4组，每组20只。按人体推荐剂量的30，65，100 倍设 3 个剂量组 （1.2，2.6，4.0 g/kg·bw/d），另设一个空白对照组0 g/kg·bw/d，连续给样30 d。每周测1次动物体重和2次食物摄入量，计算食物利用率。30 d后，隔夜禁食，麻醉，取血测其血液学指标和血液生化指标，摘取肝、肾、脾、睾丸和卵巢称重，计算脏体比。选取对照组和高剂量组肝、脾、肾、胃、十二指肠、睾丸和卵巢制作病理切片进行组织病理学检查。

文章来源：《工程与试验》 网址: http://www.gcysyzz.cn/qikandaodu/2021/0730/2257.html