文章摘要:核黄素（riboflavin）又名维生素B2，是人体必不可少的营养物质之一，而鸟苷三磷酸（guanosine triphosphate， GTP）则是核黄素合成的重要前体。为在高产菌株的基础上进一步提高核黄素产量，该研究以高产核黄素的枯草芽孢杆菌S1为出发菌株，利用CRISPER/Cas9介导的基因组碱基编辑技术对嘌呤合成途径阻遏蛋白基因以及GMP还原酶基因进行失活，并利用质粒过表达的方法进行了一系列的代谢工程改造。结果显示，guaC基因的失活阻断了GMP到IMP的回补途径，使GMP得到积累，使核黄素产量达到3.04 g/L，而purR基因的失活没有效果；使用PvegI启动子过表达希瓦氏菌来源的ribA后，核黄素产量提高到3.33 g/L。将失活guaC基因与PvegI启动子过表达希瓦氏菌ribA结合，最终使核黄素产量达到3.43 g/L，较出发菌株核黄素产量提升22%，转化率提升25.8%。

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